Evaluación de la mineralización en mandíbula y diente de trucha arcoíris (Oncorhynchus mykiss) mediante microscopía electrónica de barrido de presión variable acoplada a detector de espectroscopía de rayos X de energía dispersiva / Evaluation of mineralization in jaw and teeth of rainbow trout (Oncorhynchus mykiss) using variable pressure scanning electron microscopy coupled to energy-dispersive X-ray spectroscopy detector

RESUMEN: En salmonicultura se utilizan imágenes de rayos X, para evaluar la columna vertebral y las aletas, pero estas no permiten cuantificar los minerales que constituyen el hueso, para esto se utilizan otras técnicas que son destructivas. La Microscopía Electrónica de Barrido de presión variable (VP SEM) acoplada al detector espectroscopia de rayos X de energía dispersiva (EDX) acoplado, nos permite analizar la microestructura y a la vez determinar elementos químicos, porcentaje y distribución presentes en puntos específicos en una muestra. Se utilizaron 5 truchas control y 5 con deformidad mandibular, de agua dulce en etapa de smolt, se analizó la estructura y mineralización del hueso, se eligieron en promedio 6 puntos de cuantificación por región de interés y se analizaron mediante Microscopía Electrónica de Barrido (VP SEM-EDX). Los datos obtenidos muestran porcentaje en masa de Ca promedio en hueso articular de truchas fueron de 8.07 % y de 14.48 % en truchas con deformidad mandibular y control respectivamente y el porcentaje en masa promedio de P es de 4.07 % y 7.60 %, en truchas con deformidad mandibular y control respectivamente. Se identificó además otros elementos presentes en la muestra como Mg, Na, C, O, N, S, F, Zn, Al y Fe, con especial interés en el aumento de carbono en las muestras analizadas con deformidad mandibular y la presencia de aluminio en todas las muestras. La Técnica de VP SEM-EDX, permite evaluar de forma directa, sin destrucción de la muestra y con una preparación mínima de la muestra. En el hueso, la aplicación más frecuente de SEM-EDX es la medición del contenido de Ca y P y la relación que existe entre estos elementos Ca/P, en la muestra. Paralelamente la técnica nos permite la detección de otros microelementos provenientes del agua o de la alimentación y que eventualmente pueden provocar alteraciones en los peces, confirmando la hipótesis que el microanálisis elemental tiene utilidad para la salmonicultura.

SUMMARY: In salmon farming systems, X-ray images are used to evaluate the spine and fins, but these do not allow quantifying the minerals that make up the bone, for different techniques that are destructive are used. Variable Pressure Scanning Electron Microscopy (VP SEM) coupled to an Energy Dispersive X-ray spectroscopy detector (EDX), allows us to analyze the microstructure and at the same time determine chemical elements, percentages, and distribution present at specific points in a sample. Five control and five jaw deformity trout, from freshwater and in the smolt stage were used. The structure and mineralization of the bone were analyzed, an average six quantification points were chosen per region of interest (ROI) and then they were analyzed by Scanning Electron Microscopy (VP SEM-EDX). The data obtained have shown the average mass percentage of calcium in trout joint bone was 8.07 % and 14.48 % in jaw deformity and control trout, respectively; and the average mass percentage of phosphorus is 4.07 % and 7.60 %, in jaw deformity and control trout, respectively. Other elements present in the sample were also identified, such as magnesium, sodium, carbon, oxygen, nitrogen, sulphur, fluorine, zinc, aluminium, and iron, with special interest the increase of carbon in the analyzed samples with mandibular deformity and the presence of aluminum in all samples. The VP SEM-EDX Technique allows direct evaluation, without destruction of the sample and with minimal sample preparation. In bone, the most frequent application of SEM-EDX is the measurement of the content of calcium (Ca) and phosphorus (P) and the relationship that exists between these elements, calcium/phosphorus (Ca/P), in the sample. At the same time, the technique allows us to detect other microelements from water or food that can eventually cause alterations in fish, confirming the hypothesis that elemental microanalysis is useful for salmon farming.

Ulmoplus® increases FGF-2 expression and promote burn wound healing / Ulmoplus® incrementa la expresión de FGF-2 y promueve la cicatrización de heridas por quemadura

SUMMARY: The role of fibroblast growth factor (FGF) in the wound repair process has been described, particularly during the stimulation of angiogenesis in the proliferative phase. Ulmo honey (Eucryphia cordifolia) has demonstrated important bactericidal, fungicidal, antioxidant and healing properties. Ulmoplus®, a honey-based medicinal product, accelerates healing time and promotes fibroblast activation and collagen fiber production. The aim of this study was to evaluate the immunohistochemical expression of endogenous FGF-2 in burns treated with Ulmoplus® vs. the gold standard (hydrogel-tull), and Ulmo honey as the first step to clarifying the regulatory mechanism of this therapeutic option. 15 adult guinea pigs (Cavia porcellus) were used, divided into three groups: C+: positive control treated with hydrogel-tull (gold standard); E1: experimental group treated with Ulmo; and E2: experimental group treated with Ulmoplus®. A deep uniform burn was made under anesthetic that covered 1 cm2 of the skin on the back of each animal. The daily treatments were administered with hydrogel-tull, Ulmo honey or Ulmoplus®, where appropriate. On treatment day 10 the biopsies were taken and processed for histological and immunohistochemical analysis. The immunolabeling was quantified through an integrated optical density (IOD) analysis, expressed as lum/ µm2 using the Image- ProPremier 9.1 software. The endogenous expression of FGF-2 was consistent with the stage of healing presented by the study groups, varying in its localization and IOD intensity. The E2 group presented a significantly higher IOD (60053.55 ± 59877.84 lum/µm2) than the C+ (p = 0.001) and E1 (p = 0.001) groups. Our findings indicated that the medicinal Ulmoplus® honey is effective at facilitating wound closing, and the promoter effect of FGF-2 expression accelerated the healing process compared to the treatments with hydrogel-tull (gold standard) and Ulmo honey.

RESUMEN: Se ha descrito el papel del factor de crecimiento fibroblaástico (FGF) en el proceso de reparación de heridas, particularmente durante la estimulación de la angiogénesis en la fase proliferativa. La miel de Ulmo (Eucryphia cordifolia) ha demostrado importantes propiedades bactericidas, fungicidas, antioxidantes y cicatrizantes. Ulmoplus®, un medicamento a base de miel, acelera el tiempo de cicatrización y promueve la activación de fibroblastos y la producción de fibras colágenas. El objetivo de este estudio fue evaluar la expresión inmunohistoquímica del FGF-2 endógeno en quemaduras tratadas con Ulmoplus® frente al gold standard (hidrogel-tull) y miel de Ulmo como primer paso para esclarecer el mecanismo regulador de esta opción terapéutica. Se utilizaron 15 cobayas adultos (Cavia porcellus), divididos en tres grupos: C +: control positivo tratado con hidrogel-tull (gold standard); E1: grupo experimental tratado con Ulmo; y E2: grupo experimental tratado con Ulmoplus®. Se realizó una quemadura profunda uniforme bajo anestesia que cubrió 1 cm2 de la piel del lomo de cada animal. Los tratamientos diarios se administraron con hidrogel-tull, miel de Ulmo o Ulmoplus®, en cada caso. El día 10 de tratamiento se tomaron biopsias y se procesaron para análisis histológico e inmunohistoquímico. El inmunomarcaje se cuantificó mediante análisis de densidad óptica integrado (DOI), expresado como lum/µm2 utilizando el software Image-ProPremier 9.1. La expresión endógena de FGF-2 fue consistente con la etapa de cicatrización presentada por los grupos de estudio, variando en su localización e intensidad de DOI. El grupo E2 presentó una DOI significativamente mayor (60053,55 ± 59877,84 lum/µm2) que los grupos C + (p = 0,001) y E1 (p = 0,001). Nuestros hallazgos indicaron que la miel de uso médico Ulmoplus® es eficaz para facilitar el cierre de heridas, y el efecto promotor de la expresión de FGF-2 aceleró el proceso de curación en comparación con los tratamientos con hidrogel-tull (gold standard) y miel de Ulmo.

Immunohistochemical Markers in the Differential Diagnosis of Melanoma and Nevus in Humans

SUMMARY: Immunohistochemistry allows in situ detection of cell and extracellular components through specific antibodies. The objective was to compare the immunohistochemical expression patterns of the S-100, HMB-45 and MART-1 proteins for differential diagnosis of malignant melanoma and melanocytic nevus in human skin biopsies. Thirty-nine biopsies of human tissue were used. They were divided into two groups: 19 in malignant melanoma and 20 in melanocytic nevi. Next, the samples were fixed with paraformaldehyde and processed following the protocol for inclusion. Then, immunohistochemical staining was performed. Finally, the histological and qualitative analysis of the samples was carried out. S-100, HMB-45, and MART-1 markers showed positive immunoreaction in melanoma biopsies. HMB-45 marker was generally present with weaker expression than S-100 and MART-1 in melanocytic nevus biopsies. No expression pattern was observed which specifically associates one or more markers with some types of histopathological diagnosis. Immunohistochemistry is fundamental in differential diagnosis of melanomas and melanocytic nevi. However, there is no antibody or set of antibodies which allows unequivocal diagnosis between melanoma and nevus. It is therefore necessary to analyze with care the expression pattern and location of the lesion using standard morphological characteristics.

RESUMEN: La inmunohistoquímica permite la detección in situ de componentes celulares y extracelulares a través de anticuerpos específicos. El objetivo de nuestro estudio fue comparar los patrones de expresión inmunohistoquímica de las proteínas S-100, HMB-45 y MART-1 para el diagnóstico diferencial de melanoma maligno y nevo melanocítico en biopsias de piel humana. Se utilizaron treinta y nueve biopsias de tejido humano, las que fueron divididas en dos grupos: 19 en melanoma maligno y 20 en nevos melanocíticos. A continuación, las muestras se fijaron con paraformaldehído y se procesaron siguiendo el protocolo convencional para su inclusión. Luego, se realizó la tinción inmunohistoquímica. Finalmente, se realizó el análisis histológico y cualitativo de las muestras. Los marcadores S-100, HMB- 45 y MART-1 mostraron inmunorreacción positiva en biopsias de melanoma. El marcador HMB-45 estuvo generalmente presente con una expresión más débil que S-100 y MART-1 en biopsias de nevo melanocítico. No se observó ningún patrón de expresión que asocie específicamente uno o más marcadores con algunos tipos de diagnóstico histopatológico. La inmunohistoquímica es fundamental en el diagnóstico diferencial de melanomas y nevos melanocíticos. Sin embargo, no existe ningún anticuerpo o panel de anticuerpos que permita un diagnóstico inequívoco entre el melanoma y el nevo. Por tanto, es necesario analizar con cuidado el patrón de expresión y la localización de la lesión utilizando características morfológicas estándar.

Relationship between ethanol intake and insulin sensitivity metabolism in men with no comorbidities: a systematic review / Relación entre la ingesta de etanol y el metabolismo de la sensibilidad a la insulina en hombres sin comorbilidades: una revisión sistemática

SUMMARY: The association of alcohol consumption with type 2 diabetes has been explained by increased insulin sensitivity, anti-inflammatory effects, or effects of adiponectin. The aim was to launch a consistent relation between alcohol intake and insulin sensitivity. Several databases (MEDLINE, EMBASE, Scopus and Web of Science) were searched from 1990 to April 2020 for studies in English, using MeSH terms and text words involving to alcohol consumption and insulin sensitivity. Protocol registered on PROSPERO CRD42020205107. A total of seven original articles were analyzed, where four collected data through cross-sectional study, two papers with randomized crossover design, and one used a non-randomized study. The protective effect of moderate alcohol consumption on type 2 diabetes has been described, where an improvement on insulin levels has been shown in adults between 26.5-57 years old. Our research shows that alcohol effects on blood insulin levels could vary depending of the type of alcoholic drink ingested; and that alcohol intake increased leptin and adiponectin levels, suggesting that alcohol consumption may increase glucose catabolism promoting insulin sensitivity via leptin and adiponectin. However, original studies should consider time of exposure, age, dosage, ethnicity, and alcohol type in order to conclude right affirmations.

RESUMEN: La asociación del consumo de alcohol con la diabetes tipo 2 se ha explicado por una mayor sensibilidad a la insulina, efectos antiinflamatorios o efectos de la adiponectina. El objetivo fue establecer una relación coherente entre la ingesta de alcohol y la sensibilidad a la insulina. Se realizaron búsquedas en varias bases de datos (MEDLINE, EMBASE, Scopus y Web of Science) desde 1990 hasta abril de 2020 en busca de estudios en inglés, utilizando términos MeSH y palabras de textos relacionadas con el consumo de alcohol y la sensibilidad a la insulina. Protocolo registrado en PROSPERO CRD42020205107. Se analizaron un total de siete artículos originales, donde cuatro recopilaron datos a través de un estudio transversal, dos artículos con diseño cruzado aleatorizado y uno utilizó un estudio no aleatorizado. Se ha descrito el efecto protector del consumo moderado de alcohol sobre la diabetes tipo 2, donde se ha demostrado una mejora de los niveles de insulina en adultos entre 26,5 y 57 años. Nuestra investigación muestra que los efectos del alcohol sobre los niveles de insulina en sangre pueden variar según el tipo de bebida alcohólica ingerida; y que la ingesta de alcohol aumenta los niveles de leptina y adiponectina, lo que sugiere que el consumo de alcohol puede aumentar el catabolismo de la glucosa promoviendo la sensibilidad a la insulina a través de la leptina y la adiponectina. Sin embargo, los estudios originales deben considerar el tiempo de exposición, la edad, la dosis, el origen étnico y el tipo de alcohol para concluir afirmaciones correctas.

Intermittent fasting, nutritional supplementation, and resistance training as strategy for body weight loss: an update / Ayuno intermitente, suplementación nutricional y entrenamiento de resistencia como estrategia para la pérdida de peso corporal: una actualización

SUMMARY: Obesity is a multifactorial disease, affecting, along with overweight, over a third of the adult population worldwide. Although weight control is beneficial, the problem of poor compliance in weight loss programs is well known. Therefore, different strategies have been described against overweight. Among them, strategies such as intermittent fasting, time-restricted feeding and Ramadan fasting have been identified. In recent years, other strategies such as nutritional supplementation have gained significance on weight loss, mainly due to focusing on body composition is even more important than overall weight. In this sense, consumption of nutritional supplements in athletes and sedentary people have shown beneficial effects. Also, supplement intake such, protein, creatine and beta-hydroxy-beta-methylbutyrate; combined with resistance training resulted in an increased body weight and fat-free mass. So, although resistance training increases muscle mass and resting metabolic rate, it does not result in weight loss without caloric restriction. Despite this, it seems even without caloric restriction, has favorable effect on body composition because it decreases fat mass, including abdominal fat. According to the evidence, our review suggests that a strategy for improving body composition might be to use a mixed protocol that includes intermittent fasting, nutritional supplementation intake, and resistance training.

RESUMEN: La obesidad es una enfermedad multifactorial, afectando junto al sobrepeso, un tercio de la población mundial adulta. Aunque el control del peso es beneficioso, el problema del mal cumplimiento en los programas de pérdida de peso es bien conocido. Por lo que, distintas estrategias han sido descritas para combatirlo. Entre ellas, se han identificado estrategias como el ayuno intermitente, la alimentación con restricción de tiempo y el ayuno de Ramadán. En los últimos años, otras estrategias como la suplementación nutricional han ganado importancia en la pérdida de peso, principalmente debido a que centrarse en la composición corporal es incluso más importante que la pérdida de peso general. En este sentido, el consumo de suplementos nutricionales, como proteínas, creatina y beta-hidroxi-beta-metilbutirato; en atletas y personas sedentarias ha mostrado efectos beneficiosos.Asimismo, la ingesta de suplementos combinada con el ejercicio de resistencia resulta en un aumento del peso corporal y masa libre de grasa. Por lo que, aunque el ejercicio de resistencia produce un aumento en la masa muscular y la tasa metabólica en reposo, este no provoca pérdida de peso sin restricción calórica. Pese a ello, tiene un efecto favorable sobre la composición corporal porque disminuye la masa grasa, incluida la grasa abdominal. Nuestra revisión sugiere que una estrategia para mejorar la composición corporal podría ser la utilización de un protocolo mixto que incluya el ayuno intermitente, el consumo de suplementos nutricionales y el entrenamiento de resistencia.

Comparative study on erythrogram parameters of Cell-Dyn Ruby and Humacount 5l / Estudio comparativo de los parámetros del eritrograma de Cell-Dyn Ruby y Humacount 5l

SUMMARY: The use of hematological counts for the prevention, diagnosis and follow-up of hematological diseases has increased. Indeed, the correct operation of a clinical laboratory is essential to producing comparable results. However, there is a paucity of validation and reproducibility studies among the different existing methods for clinical analysis. Therefore, our aim was to assess the commutability of the results provided by analyzers with different measuring systems. Sixty venous blood samples were obtained from patients, without discriminating for age or sex. Then, an automated hematological analysis was performed using the Cell-Dyn Ruby and HumaCount 5L instruments. The variables measured were: RBC, Hb, HCT, MCV, MCH and MCHC. The data were compared by a one-way ANOVA and Pearson's correlation coefficient. Statistical significance was fixed at p < 0.05. There were no statistically significant differences for RBC, HCT, MCH or MCHC. In addition, with the exception of MCHC, all the analytes showed a good correlation coefficient between the two instruments. There is a variety of automated systems for the clinical laboratory and it is essential for the clinician to know the different methodologies used in hematological analyzers as well as their sensitivity and specificity. Therefore, our results are useful for demonstrating the importance of practical knowledge of the analyzers mentioned.

RESUMEN: El uso de recuentos de células sanguíneas para la prevención, diagnóstico y monitoreo de enfermedades hematológicas ha ido en aumento. Por ello, el funcionamiento correcto de un laboratorio clínico es indispensable para producir resultados comparables. Sin embargo, existen pocos estudios de validación y reproducibilidad de los diferentes métodos de análisis clínico existentes. Por lo tanto, nuestro objetivo fue evaluar la intercambiabilidad de los resultados entregados por los analizadores que utilizan diferentes sistemas de medición. Se obtuvieron sesenta muestras de sangre venosa de pacientes, sin discriminar por edad o sexo. Los eritrogramas fueron obtenidos utilizando los analizadores automatizados Cell-Dyn Ruby y HumaCount 5L. Las variables medidas fueron: RBC, Hb, HCT, MCV, MCH y MCHC. Los datos fueron comparados por ANOVA a una vía y la correlación de Pearson. La significación estadística se estableció en el nivel estándar p<0,05. No hubo diferencias estadísticamente sig- nificativas para RBC, HCT, MCH y MCHC. Con la excepción de la MCHC, todos los analitos presentaron un buen coeficiente de correlación entre los dos analizadores comparados. Existen varios sistemas de automatización para su uso en laboratorios clínicos. Por lo tanto, es primordial para el clínico estar familiarizado con las diferentes metodologías utilizadas en los analizadores de sangre, así como su sensibilidad y especificidad. Nuestros resultados son útiles para mostrar la importancia del conocimiento práctico de los diferentes sistemas de medidas comparados.

Características morfocuantitativas de la glándula submandibular de ratón (Mus musculus) / Morphocuantitative characteristics of the mouse (Mus musculus) submandibular gland

El ratón (Mus musculus) es un buen modelo animal de experimentación, donde sus glándulas salivales han sido utilizadas en estudios, especialmente de tipo preclínico. Sin embargo, las diferencias en la morfología de estas glándulas y, en particular de las submandibulares, entre humanos y roedores no son de conocimiento común. Por lo anterior, el objetivo de este estudio fue conocer las características morfocuantitativos de la glándula submandibular del ratón macho C57BL/6. Se utilizaron cinco ratones macho, cepa C57BL/ 6, de 11 a 13 semanas de nacidos, con un peso promedio de 30 g. Luego de su ambientación, los ratones fueron eutanasiados. Para el análisis histológico, las glándulas fueron extraídas y fijadas en formalina tamponada por 48 horas, procesada para su inclusión en paraplast y teñidas con hematoxilina y eosina, azul alcián pH 2,5, ácido peryódico de Schiff y Picrosirius Red. Se determinaron las características estereológicas de densidad de longitud (LVcond), de volumen (VVcond) y de superficie (SVcond) de los conductos. En las células acinares se evaluó la densidad de número (NVcel) y la densidad de volumen (VVcel). Para cada variable se obtuvo la media ± desviación estándar. La glándula submandibular se encontraba organizada de manera lobulada, cuyo parénquima era de tipo túbuloacinar mixto con predominio seroso, que se conectaba a través de conductos. Las células acinares presentaban reacción positiva para azul alcián y ácido peryódico de Schiff. El estroma de la glándula contenía principalmente colágeno tipo 1. Los resultados de las mediciones estereológicas fueron: LVcond = 220,02 ± 50,51 mm/mm3; VVcond = 50,48 ± 9,55 %; SVcond = 26,39 ± 5,45 mm2/mm3; NVcel = 16,85 x 104 ± 9,13 × 104/mm3; VVcel = 24,98 ± 6,22 %. Con los análisis presentados es posible realizar investigaciones experimentales, considerando las similitudes y diferencias morfocuantitativas que presenta la glándula submandibular de ratón macho, cepa C57BL/6 con la del humano.

The mouse (Mus musculus) is a good experimental animal model, where murine salivary glands have been widely used in research by their similarities with human glands. Stereology is a tool that has to demonstrated to be valuable in biomedical researc h. Therefore, the objective was to realize an analogy between morphology, function and morpho-quantitative characteristics of the C57BL/6 mouse submandibular gland. Five male mice, C57BL/6, from 11 to 13 weeks old were used, with an average weight of 30 g. After seven days, the mice were euthanized and the samples were extracted. Then, these were processed following the conventional histological processing protocol and stained with H&E, Picrosirius Red, AA and PAS. Finally, the histological and stereological analysis of the samples was performed. In the glandular ducts the length density (LVcond), volume density (VVcond) and surface density (SVcond) were determined; whereas, in the acinar cells the density of number (NVcel) and the density of volume (VVcel) were evaluated. For each stereological variable the mean ± standard deviation was obtained. The histological study revealed no discrepancies as previously described. Descriptive statistical analysis revealed the following: LVcond = 220.02 ± 50.51 mm/mm3; VVcond = 50.48 ± 9.55 %; SVcond = 26.39 ± 5.45 mm2/mm3; NVcel = 168467.38 ± 91288.67 /mm3 and VVcel = 24.98 ± 6.22 %. From this study, it will be possible to conduct comparative experimental research analyzing quantitative results from those presented in this research. From this study, it will be possible to carry out comparative experimental research, analyzing quantitative results from those presented in this investigation.

Reparación de lesiones musculares por incisión quirúrgica coadyuvada con una formulación basada en miel nativa (Ulmoplus®): estudio experimental en modelo animal de conejo (Pryctolagus cuniculus) / Repair of muscle injuries by coadjugated surgical incision with a native honey formulation (Ulmoplus®): experimental study on rabbit animal model (Oryctolagus cuniculus)

Para promover la reparación y regeneración muscular, se han desarrollado diferentes estrategias, sin embargo, aún no existe un tratamiento único aceptado. Investigaciones relacionan los efectos terapéuticos de la miel en el proceso de cicatrización de heridas de diversas etiologías. Considerando lo anterior, el propósito de este estudio fue evaluar los efectos de una formulación basada en miel nativa (Ulmoplus®) en la reparación de lesiones musculares por incisión quirúrgica. A cinco conejos (Oryctolagus cuniculus) se les realizó una incisión de 20 mm de largo y 3 mm de ancho en la región anterior de cada pierna, atravesando la epidermis, dermis y el músculo tibial anterior, hasta alcanzar el periostio de la tibia. La pierna izquierda de cada animal fue clasificada como grupo sutura (S) y la derecha como grupo sutura más Ulmoplus® (S+U). Posteriormente, al grupo S+U se le aplicó Ulmoplus® en toda la extensión de la herida. Luego, en ambos grupos, la incisión fue suturada con cuatro puntos intradérmicos (vicryl 2/0). Un animal fue considerado como control para obtener imágenes histológicas del músculo tibial anterior sin injuria. A los 10 días post incisión, fueron tomadas las biopsias del músculo y posteriormente fueron procesadas para su observación en microscopio de luz. El estudio se llevó a cabo considerando las recomendaciones de la Guía para el Cuidado y Uso de Animales de Laboratorio. A los 10 días post incisión, las injurias, en ambos grupos de animales, se encontraban cerradas y sin signos de infección. El músculo tibial anterior de los especímenes del grupo S se encontraba en la fase de reparación, con procesos concomitantes de fagocitosis del tejido necrotizado, regeneración de miofibras y formación de tejido conectivo cicatrizal. El músculo tibial anterior de los animales del grupo S+U se encontraba en la fase de remodelación, ya que la arquitectura muscular se evidenciaba restablecida. Ulmoplus®, como coadyuvante en el proceso de cierre de heridas quirúrgicas de músculo esquelético utilizando sutura convencional, es una buena alternativa, ya que acelera el proceso de reparación muscular, y reduce el tejido conectivo cicatrizal.

To promote muscle repair and regeneration, different strategies have been developed, however, there is still no single accepted treatment. Research relates the therapeutic effects of honey in the wound healing process of various etiologies. The aim of this study was to evaluate the effects of native honey formulation (Ulmoplus®) in the repair of muscle injuries by surgical incision. In five rabbits (Oryctolagus cuniculus) were made an incision 20 mm long and 3 mm wide in the anterior region of each leg, crossing the epidermis, dermis and anterior tibial muscle, until reaching the tibia periosteum. The left leg of each animal was classified as a suture group (S) and the right leg as a suture group plus Ulmoplus® (S + U). Subsequently, Ulmoplus® was applied to the entire S + U group throughout the entire length of the wound. Then, in both groups, the incision was sutured with four intradermal points (vicryl 2/0). An animal was considered as a control to obtain histological images of the anterior tibial muscle without injury. At 10 days post incision, muscle biopsies were taken and subsequently processed for observation under light microscopy. The study was carried out considering the recommendations of the Guide for the Care and Use of Laboratory Animals. At 10 days post incision, the injuries, in both groups of animals, were closed and without signs of infection. The anterior tibial muscle of the S group specimens was in the repair phase, with concomitant processes of phagocytosis of the necrotized tissue, myofiber regeneration and formation of scar connective tissue. The anterior tibial muscle of the animals of the S + U group was in the remodeling phase, since the muscular architecture was evidenced restored. Ulmoplus®, as an adjunct in the process of closing surgical wounds of skeletal muscle using conventional suture, is a good alternative, since it accelerates the muscle repair process and reduces scar connective tissue.

Descripción histológica de los daños ocasionados por monoiodo acetato de sodio en articulación humeral de rata / Histologyc description of monosodium iodoacetate damage in rat humeral joint

La inyección con monoiodo acetato de sodio (MIA) es ampliamente utilizada para producir osteoartritis en diversas articulaciones. El objetivo fue describir los daños histológicos provocados por MIA en la articulación humeral de rata. Se inyectó 0,1 mL de mezcla de 0,5 mg de MIA disuelto en 10 mL de solución fisiológica en la articulación humeral izquierda de 21 ratas SpragueDawley. Como control se utilizó la articulación derecha de cada rata. Se realizó la eutanasia a las 4, 8 y 12 semanas post inyección en grupos de 7 ratas. Los miembros mantenidos en formalina tamponada al 10% fueron descalcificados con EDTA por tres meses. Para la evaluación histológica se realizó la inclusión en parafina y se realizaron cortes coronales de 5 µm de espesor, para posterior tinción con azul de toluidina. En el cartílago sano, se observó una superficie lisa sin fisuras, todas las células de las zonas del cartílago se observaron normales. Se observaron cambios en el cartílago articular a partir de las 4 semanas post inyección, los condrocitos de la zona radial hipertróficos con gran producción de proteoglicanos. A las 12 semanas post inyección, se observa un gran deterioro, el espacio articular se ve disminuido, La superficie del cartílago se observa con fisuras y grietas que llegan hasta la zona radial. Las células alrededor de estas fisuras han desaparecido. Se observa una pérdida prominente de proteoglicanos debido a la débil tinción con azul de toluidina. La inyección articular con MIA produce lesiones similares a la OA. La gran ventaja de la OA inducida por MIA, es la facilidad de su aplicación y la rapidez en la progresión de OA.

Injection with monoiode sodium acetate (MIA) is widely used to produce osteoarthritis in various joints. The aim of this work was to describe the histological damage caused by MIA in the rat humeral joint; 0.1 mL of 0.5 mg mixture of MIA dissolved in 10 mL of physiological solution was injected into the left humeral joint of 21 Sprague-Dawley rats. As a control, the right joint of each rat was used. Euthanasia was performed at 4, 8 and 12 weeks post injection in groups of 7 rats. The samples maintained in 10 % buffered formalin were descaled with EDTA for three months. For histological evaluation, paraffin inclusion was performed and 5 µm thick coronal cuts were made for subsequent staining with toluidine blue. In the healthy cartilage, a smooth surface was observed, all cells in the cartilage areas were normal. Changes in articular cartilage were observed after 4 weeks post injection, hypertrophic radial chondrocytes with high proteoglycan production. At 12 weeks post injection, a great deterioration was observed, the articular space was diminished. The surface of the cartilage was observed with fissures and cracks that reach the radial zone. The cells around these fissures have disappeared. A prominent loss of proteoglycans was observed due to weak toluidine blue staining. Joint injection with MIA produced lesions similar to OA. The great advantage of the OA induced by MIA, is the ease of its application and the rapidity in the progression of OA.

Identificación y estudio de susceptibilidad antimicrobiana en cepas de mycobacterium spp. aisladas en un hospital de alta complejidad / Identification and study of antimicrobial susceptibility of isolated mycobacterium spp. strains in a hospital of high complexity

El género Mycobacterium se encuentra asociado a una cantidad importante de patologías, donde la tuberculosis destaca dentro de los principales problemas de salud pública a nivel mundial y nacional. Esta se agudiza con el incremento en la resistencia antimicrobiana y, por ello, la pesquisa de micobacterias contempla un pilar fundamental en el diagnóstico de patologías infecciosas de importancia clínica. Por lo tanto, el objetivo fue describir las principales especies de micobacterias aisladas y su patrón de susceptibilidad a partir de muestras clínicas procesadas en el Hospital Dr. Hernán Henríquez Aravena durante el año 2012. Se realizó un estudio descriptivo retrospectivo, en donde se utilizaron los resultados de 7023 baciloscopías procesadas en el Laboratorio Clínico del Hospital Dr. Hernán Henríquez Aravena de Temuco el año 2012. Todas las baciloscopías fueron analizadas y solicitadas según criterios establecidos por el Instituto de Salud Pública de Chile, comprendiendo muestras de expectoración y no expectoración. De las 7023 baciloscopías realizadas, 100 resultaron ser positivas para Mycobacterium. De 21 cepas enviadas al Instituto de Salud Pública de Chile para identificación, 19 cepas corresponden al complejo Mycobacterium tuberculosis y dos a Mycobacterium avium intracelular. En el estudio de sensibilidad, se encontró resistencia a estreptomicina e isoniazida en 13,3 % de las expectoraciones. De acuerdo a lo establecido por la literatura, más del 90 % pertenecen a Mycobacterium tuberculosis, mientras que, de las micobacterias no tuberculosas sólo se aislaron Mycobacterium avium intracelular. Los antimicrobianos con mayores niveles de resistencia son estreptomicina e isoniazida.

The genus Mycobacterium is associated with a significant number of pathologies, where tuberculosis stands out among the main public health problems worldwide and nationally. This is exacerbated by the increase in antimicrobial resistance and, therefore, the research of mycobacteria contemplates a fundamental pillar in the diagnosis of infectious pathologies of clinical importance. Therefore, the aim was to describe the main species of isolated mycobacteria and their susceptibility pattern from clinical samples processed at the Dr. Hernán Henríquez Aravena Hospital during 2012. A retrospective descriptive study was carried out, where the results of 7023 sputum microscopy processed in the Clinical Laboratory of the Dr. Hernán Henríquez Aravena Hospital in Temuco in 2012. All sputum microscopy was analyzed and requested according to criteria established by the Instituto de Salud Pública of Chile, including expectoration and non-sputum samples. Of the 7023-sputum microscopy performed, 100 were positive for Mycobacterium. Of 21 strains sent to the Instituto de Salud Pública of Chile for identification, 19 strains correspond to the Mycobacterium tuberculosis complex and two to intracellular Mycobacterium avium. In the sensitivity study, resistance to streptomycin and isoniazid was found in 13.3 % of the expectorations. According to what is established by the literature, more than 90 % belong to Mycobacterium tuberculosis, while only intracellular Mycobacterium avium was isolated from non-tuberculous mycobacteria. Antimicrobials with higher levels of resistance are streptomycin and isoniazid.

Effects of high-fat diets on biochemical profiles and morpho- quantitative characteristics of C57BL/6 mice adrenal glands / Efectos de la dieta alta en grasa sobre el perfil bioquímico y las características morfo-cuantitativas de la glándula suprarrenal de ratón C57BL/6

According to the information provided by the World Health Organization (WHO), overweight and obesity are the fifth leading causes of death in the world. Due to the alarming increase of this disorder in recent years, studies have been carried out to evidence harmful effects on human or animal tissues. Our objective was to evaluate the morphological and physiological changes of C57BL/6 mice adrenal glands (AGs), associated with high fat diets (HFDs), we used 14 male mice, 5 months old, fed for 14 weeks according to two diets. The standard chow group (SC) was fed AIN-93M and the high fat group (HF) was fed AIN-93M-HF. At the end of the experiment, biometric analysis was performed and euthanasia was performed. Blood was then extracted for biochemical analysis and AGs were processed for mesoscopic, histological, morphometric and stereological studies. We used Student's t-test (p<0.05) for statistical analysis. SC group showed a lower weight (29.67±1.28 g) with respect to the HF group (38.46±4.68 g, p=0.002). COL-T, HDL-C, TG and CORT analysis revealed differences between SC group and HF (p≤0.001). Focally, in the fasciculate area, there was an increase in the core-cytoplasm ratio and a greater lipid vacuole presence and size. There was a significant reduction (p=0.001) in Vvfas=7.365±3.326 % of the HF group fasciculate area compared to SC group (Vvfas=9.619±4.548 %). Obesity induced by HF diets affects adrenal gland physiology and morphology of mice. Our results suggest that both the percentage of fat as well as the time of administration of the diet, produce a diurnal reduction of corticosterone, which could be due to an increase in the metabolic clearance of this hormone and not to the inhibition of the Hypothalamus-Pituitary-Adrenal (HPA) axis.

De acuerdo a la información entregada por la OMS, el sobrepeso y la obesidad son el quinto factor principal de riesgo de muerte en el mundo. Debido al aumento alarmante de este trastorno en los últimos años, estudios evidencian efectos perjudiciales sobre tejidos humanos y animales. Por lo tanto, nuestro objetivo fue evaluar los cambios morfo-fisiológicos de la glándula suprarrenal de ratones C57BL/6 asociado a dietas altas en grasas. Utilizamos 14 ratones machos, de 5 meses, alimentados por 14 semanas con dos dietas. Grupo dieta estándar (SC), alimentados con AIN-93M y grupo alto en grasa (HF), alimentado con AIN- 93M-HF. Al finalizar el experimento, se realizó el análisis biométrico y se efectuó la eutanasia. Posteriormente, se extrajo sangre para el análisis bioquímico y cada glándula suprarrenal fue procesada para el estudio mesoscópico, histológico, morfométrico y estereológico. Para el análisis estadístico se utilizó la prueba t de Student (p<0,05). El grupo SC mostró un menor peso (29,67±1,28 g) respecto al grupo HF (38,46±4,68 g; p=0,002). El análisis del COL-T, HDL-C, TG y CORT reveló diferencias entre el grupo SC y HF (p≤0,001). En la zona fasciculada, focalmente, se observó aumento en la relación núcleo-citoplasma y, mayor presencia y tamaño de vacuolas lipídicas. Hubo una reducción significativa (p=0,001) en VVfas=7,365±3,326 % de la zona fasciculada del grupo HF, en comparación al grupo SC (VVfas=9,619±4,548 %). La obesidad inducida por la dieta HF afecta la fisiología y morfología de la glándula suprarrenal de ratones alimentados con dietas altas en grasas. Nuestros resultados sugieren que tanto el porcentaje de grasa, así como el tiempo de administración de la dieta, producen una reducción diurna de la corticosterona, lo que podría ser debido a un aumento en el aclaramiento metabólico de esta hormona y no a la inhibición del eje Hipotálamo-Hipófisis-Adrenal.

Rol del consumo de alcohol y antioxidantes sobre la metilación global del ADN y cáncer / Role of alcohol consumption and antioxidants on global methylation of DNA and cancer

RESUMEN: El alcoholismo es una enfermedad crónica recidivante asociada a disfunción psicológica, social y física. El alcohol no sólo es una droga adictiva, también produce alteraciones en las actividades y funciones de múltiples sistemas y órganos. Actualmente, diversos estudios demuestran que el ambiente puede modular la expresión génica del ADN mediante mecanismos epigenéticos, sugiriendo de esta manera, que el consumo de alcohol es un factor que puede alterar los patrones epigenéticos y, por lo tanto, los niveles de expresión génica. La metilación del ADN es un proceso epigenético que participa en la regulación de la expresión génica, impidiendo la unión de factores de transcripción y propiciando la estructura cerrada de la cromatina. En este sentido, los cambios en la metilación del ADN se reconocen como una de las formas más comunes de alteración molecular en la dependencia al alcohol y los procesos neoplásicos humanos. El alcohol puede ser un factor importante en la iniciación del cáncer, aumentando la expresión de ciertos oncogenes o reprimiendo la capacidad de las células para reparar el ADN, lo que aumenta la probabilidad de que se produzcan mutaciones oncogénicas. Sin embargo, los mecanismos exactos de la patogénesis del cáncer ligada al consumo de alcohol aún permanecen sin ser dilucidados. Por lo anterior, el objetivo de la presente revisión fue describir los mecanismos de metilación del ADN y su relación con el consumo de alcohol y cáncer.

SUMMARY: Alcoholism is a chronic relapsing disease associated with psychological, social and physical dysfunction. Alcohol is not only an addictive substance, it also alters action and function of multiple systems and organs. Currently, several studies show that the environment can modulate gene expression of DNA by epigenetic mechanisms, thereby suggesting that alcohol consumption is a factor that can alter epigenetic patterns and therefore, the levels of gene expression. DNA methylation is an epigenetic process, that is a part of gene expression regulation preventing binding of transcription factors and encouraging the closed structure of chromatin. In this sense, changes in DNA methylation are recognized as one of the most common forms of molecular alteration in alcohol dependence and human neoplastic processes. Alcohol can be an important factor in activating the cancer by increasing the expression of certain oncogenes or repressing the ability of cells to repair DNA, which increases the likelihood of oncogenic mutations. However, the exact mechanisms of the pathogenesis of cancer linked to alcohol consumption remain unclear. Therefore, the objective of this review was to describe the mechanisms of DNA methylation and its relation to alcohol consumption and cancer.

Ethanol intake and toxicity: in search of new treatments / Ingesta de etanol y toxicidad: en búsqueda de nuevos tratamientos

Prolonged alcohol consumption has consequences on the liver, producing necrotic precipitates and fibrosis, on the pancreas, causing the pancreatic acini to atrophy and destroying insulin-producing cells, and on the central nervous system (CNS), causing the gray and white matter in the frontal lobes of the brain and cerebellum to atrophy. Generally, alcohol is metabolized via oxidative pathways, where the enzymes alcohol dehydrogenase and aldehyde dehydrogenase participate during its metabolization in the liver and CNS, or via non-oxidative pathways during its metabolization in the pancreas. Ethanol metabolism can produce oxidative stress and tissue damage mediated by free radicals, causing morphological and functional alterations in the liver. In the pancreas, it can cause progressive and irreversible damage affecting the endocrine and exocrine functions, a result of the activation of the stellate cells, which are activated directly by alcohol, causing pancreatic fibrosis. In the CNS ethanol can bind directly to proteins, nucleic acids and phospholipids to develop its pathogenesis. The effects produced by alcohol can be counteracted by supplementation with antioxidants, which reduce the inflammation and areas of focal necrosis in the liver, inhibit the activation of pancreatic stellate cells, and reduce oxidative stress in the CNS. Additionally, in order to reduce the negative effects associated with alcohol consumption, recent studies have suggested the administration of antioxidants as a treatment strategy.

El consumo prolongado de alcohol tiene consecuencias en hígado, produciendo precipitados necróticos y fibrosis; en páncreas, provocando atrofia del acino pancreático y destrucción de las células productoras de insulina, y en Sistema Nervioso Central (SNC) generando atrofia de la sustancia gris y blanca en lóbulos frontales del cerebro y cerebelo. En general, el metabolismo del alcohol se consigue mediante las vías oxidativas, donde participan las enzimas alcohol-deshidrogenasa y aldehído deshidrogenasa durante su metabolización en hígado y SNC; o bien, mediante las vías no oxidativas durante su metabolización en páncreas. El metabolismo del etanol es capaz de producir estrés oxidativo y daño tisular mediado por radicales libres, causando alteraciones morfológicas y funcionales del hígado; en el páncreas, puede causar daño progresivo e irreversible afectando las funciones endocrinas y exocrinas de este órgano producto de la activación de las células estrelladas que son activadas directamente por el alcohol generando fibrosis pancreática; mientras que, en SNC se puede unir directamente a proteínas, ácidos nucleicos y fosfolípidos para desarrollar su patogenia. Los efectos producidos por el alcohol pueden contrarrestarse mediante la suplementación con antioxidantes, que reducen la inflamación y las zonas de necrosis focal en el hígado, inhiben la activación de células pancreáticas estrelladas, y reducen el estrés oxidativo en SNC. Asimismo, para reducir los efectos negativos asociados al consumo de alcohol, estudios recientes han propuesto la administración de antioxidantes como estrategia terapéutica.

El rol de la miel en los procesos morfofisiológicos de reparación de heridas / Rol of the miel in the morphophysiologic process of the reparation wounds

Los beneficios de la miel de abeja (Apis mellifera) se conocen desde hace miles de años y ha sido utilizada en la antigüedad por su valor nutritivo y medicinal siendo "redescubierta" por la medicina moderna debido a sus importantes propiedades anti-bacterianas en heridas infectadas. Nuevos estudios han argumentado a favor de la capacidad de la miel para interactuar con la compleja maquinaria celular y llevar a cabo la reparación de los tejidos. Por este motivo, se realizó una revisión de los contenidos actuales de las propiedades de la miel y su rol en los procesos morfofisiológicos de reparación de heridas. De esta manera se abarcó la acción anti-bacteriana, anti-oxidante y anti-inflamatoria de sus componentes. Así mismo, se revisaron las propiedades físicas y de desbridamiento, la importancia del origen floral y ubicación geográfica en el valor medicinal de los diferentes tipos de miel. Los estudios sugieren que los efectos de la miel son el resultado de una actividad combinada, donde sus componentes interactúan de manera sinérgica para lograr su función terapéutica. Su acción la realiza en todas las etapas del proceso morfofisiológico de reparación logrando acelerar la cicatrización de heridas. El origen florar y ubicación geográfica de la miel son factores importantes a considerar, ya que ésta varía en su composición y, por lo tanto, también su valor medicinal.

The benefits of honey bee honey (Apis mellifera) have been known for thousands of years and it has been used since ancient times for its nutritional and medicinal values. It was "rediscovered" by modern medicine as a result of its important anti-bacterial properties in infected wounds. New studies have argued for the ability of honey to interact with the complex cellular machinery and achieve tissue repair. Therefore, a review was carried out of current contents of the properties of honey and their role in the morphophysiological processes of wound repair. Hence, antibacterial action, anti-oxidant and anti-inflammatory components of its properties were evaluated. At the same time, we reviewed physical and wound debridement benefits, the importance of floral origin and geographical location in the medicinal value of different types of honey. The studies suggest that the effects of honey are the result of a combined activity, where its components interact synergistically to achieve therapeutic function. Its action is realized in all stages of the morphophysiological repair process, accomplishing accelerated wound healing. The floral origin and geographical location of the honey are important factors to consider since the composition of honey is variable, as is its medicinal value.

Efectos de las experiencias adversas temprana y tardía en las características morfométricas y estereológicas de la glándula suprarrenal de ratas Sprague Dawley sometidas a estrés durante su vida adulta / Effects of early and late adverse experiences in morphometric and stereological characteristics of the adrenal gland of Sprague Dawley rats subjected to stress during adulthood

La ruptura temprana del vínculo materno y el aislamiento social son variables que están involucradas con los comportamientos social y emocional y también con el aumento de la ansiedad, especialmente en situaciones estresantes. Sin embargo, no se dispone de investigaciones que expliquen los cambios morfológicos de la glándula suprarrenal (GSR). Por lo anterior, el objetivo de este trabajo fue conocer experimentalmente, a través del modelo de alteración del vínculo social temprano madre-cría y alteración del vínculo social tardío por aislamiento, el efecto sobre las características morfométricas y estereológicas de la GSR, en ratas de la cepa Sprague Dawley sometidas a estrés crónico intermitente en la vida adulta. Utilizamos 35 ratas hembras recién nacidas, distribuidas en grupos de 7, en condiciones de lactancia y alimentación estandarizadas. Los grupos experimentales fueron expuestos a experiencias adversas temprana (E1), tardía (E2), temprana-tardía (E3) y posteriormente, sometidas a estrés crónico intermitente en la adultez. Se aisló la GSR izquierda de cada animal determinando características morfométricas y parámetros estereológicos. El peso absoluto fue mayor en los grupos control C2 y grupo experimental (E1). El número de células por mm3, el porcentaje de tejido glandular y la densidad de superficie en la zona fascicular de la GSR fue menor en el grupo E3. Las características estereológicas de la GRS en ratas, no sólo pueden ser afectadas por la exposición al estrés en la adultez, sino que también las experiencias adversas temprana y/o tardía juegan un rol importante en los cambios de los parámetros morfológicos cuantitativos observados en esta glándula.

The early break in maternal bonding and social isolation are variables involved with social and emotional behaviors and also with increased anxiety, especially in stressful situations. However, there is no research to explain the morphological changes of the adrenal gland (GSR). Therefore, our objective was to experimentally study through alteration model of social ties and early mother-cub bond alteration belated social isolation, the effect on the morphometric and stereological characteristics of the GSR in rats of the Sprague Dawley subjected to intermittent chronic stress in adulthood. We used 35 newborn female rats, divided into groups of 7 under lactating and standardized feeding conditions. The experimental groups were exposed to adverse experiences early (E1), late (E2), and early/late (E3) and subsequently, subject to intermittent chronic stress in adulthood. Left GSR was isolated from each animal determining morphometric characteristics and stereological parameters. The absolute weight was higher in control group C2 and the experimental group E1. In the group E3 number of cells per mm3, the percentage of glandular tissue and density of the surface in the fascicular area of the GSR was lower. Stereological characteristics of the GRS in rats, not only can be affected by exposure to stress in adulthood, but also early and / or late adverse experiences play an important role in the changes of quantitative morphological parameters observed in this gland.